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抗原修复锅 实验室抗原修复锅的实验方法
更新时间:2017-11-24   点击次数:1460次

抗原修复锅Antigen Retriever

    
免疫组织化学方法成功与否关键在于抗原决定簇的保存和暴露.组织经甲醛固定.甲醛的醛基与

抗原蛋白的氨基交联
,使决定簇的构像改变.从而影响检测蛋白表达.要充分暴露抗原决定簇,通

常用到抗原修复锅。强烈推荐
EMS有竞争力的一款产品,适于甲醛固定的组织,经石蜡包

埋后进行免疫染色前的处理,配合特别的抗原修复缓冲液确保你得到zui搞质量的免疫染色效

果。

 

· 一次可以在6中不同缓冲液中运行,进行抗原暴露

· 仅暴露抗原决定簇,不损伤组织的形态

· 实验结果稳定,结果重现性高

· 系列的玻片在独立环境中经过处理

抗原修复锅怎样工作?

    看上去,抗原修复锅似丁香福利网站烹饪的高压锅。这是一款功能*的高压锅,主要用于抗原暴露

的工作,主要的工作原理也是装玻片的几个分室可以达到高温
(>120°C)高压。灵敏的传感控制

器来保持一定的温度和压力及一定的时间,这些工作参数都是经过严格的科学实验得到的数

据。当达到需要的温度,抗原修复锅会在该温度下保持几分钟,之后锅内玻片被冷却
2个多小

时,特殊设材质的内锅体控制了锅和玻片的冷却速度。 

谁是受益人?

    研究病理的实验室,那里需要高质量染色照片(用来发表)的

    缺乏技术人员的实验室,学生和博士后均可以处理玻片进行组织染色,且不需要很多时间来摸索

    小型病理实验室,每天处理的玻片数量有限

    样本昂贵稀有,或如组织芯片,或如*的组织样本,利用抗原修复锅,简单可靠

怎样选择一种缓冲液(Buffer)?

    如果你已经知道哪种缓冲液用在微波的某种组织抗原修复,那么用抗原修复锅时,这种缓冲

液也同时适用的机会很大。丁香福利网站提供四种即用型缓冲液R-Buffer A/B/C/U,同时也提供同种更加

温和的组织处理缓冲液,丁香福利网站称之
G系列,R-Buffer AG/BG/CG/UG

    
选择Buffer,主要考虑以下两点:


1.  抗原的自然特性以及所选择的抗体


抗原自身特性和抗原的位置都是首要考虑。丁香福利网站建议你刚开始的时候选择抗原表达环境的zui

Buffer。以下是经验供大家参考:

Most of the nuclear antigens (apoptosis-related, survival-related, proliferation-r

elated) R: Buffer A (or AG).

Cell adhesion molecules, cell membrane antigens (extracellular domain) R: Buffer A (or AG)

Cytoskeleton and cytoskeleton-associated molecules – R:Buffer A (or AG)

Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer B (or BG)

Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer C (or CG)

Most of antibodies raised against a linear peptide – R: Buffer U (or UG)

2.  固定液以及固定程度

建议的组织丁香福利导航的抗原修复处理是一种针对普通的适化状态丁香福利导航。如果用来丁香福利导航的组织块没有

充分固定,或者过固定(留在福尔马林溶液中时间过长),或者用了其它的固定液,那么,处

理组织丁香福利导航的流程方案需要重新修订,zui便利的办法是选择使用G系列缓冲液。对于过固定的

材料一般推荐用
U buffer,或者在同一Buffer里面增加循环

 

抗原修复锅技术参数:

Heigh

335 mm

Capacity

9 litres

Max. Instrument length

228 mm

Width.

340 mm

Net Weight

4.5 kilos

Internal chamber Dimensions (d/h)

210/230 mm

Max. Load Weight

3.0kg

Max. Single Fault Temperature

133.3°C


使用抗原修复锅进行染色的效果示例


1.福尔马林固定,石蜡包埋,人乙状结肠组织丁香福利导航,经抗原修复锅进行抗原暴露,R-

Buffer C (pH 6.0)
,组织玻片降温过夜,抗体MIB-1,抗原Ki-67R-Detect HRP系统染色

 

2. .福尔马林固定,石蜡包埋,人乙状结肠组织丁香福利导航,经抗原修复锅进行抗原暴露,R-

Buffer A (pH 8.1)
,组织玻片降温过夜,抗体#4B11,抗原CD8 (cell membrane)R-

Detect HRP
系统染色.

仪器及配件的选购:

货号

产品名称

规格

62700-20

Retriever 220 volt (内含3chamber

1

62705-01

Slide Chamber

3/pk

62705-02

Chamber Rack

1

62705-03

Lifting Device

1

62705-05

Cord Set (Europe)

1

缓冲液的选购:

货号

产品名称

规格

62706-10

R-Buffer A (10x)

250 ml

62706-11

R-Buffer B (10x)

250 ml

62706-12

R-Buffer C (10x)

250 ml

62706-13

R-Buffer U (10x)

250 ml

62707-10

R-Buffer AG (2x)

250 ml

62707-11

R-Buffer BG (2x)

250 ml

62707-12

R-Buffer CG (2x)

250 ml

62707-13

R-Buffer UG (2x)

250 ml

 

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